Avtoradiografiya. Radioavtografiya Sitologiyada avtoradiografiya usuli
Avtoradiografiya avtoradiografiya, radioavtografiya, oʻrganilayotgan obʼyektda radioaktiv moddalarning tarqalishini obʼyektga radioaktiv nurlanishga sezgir fotoemulsiya qoʻyish orqali oʻrganish usuli. Ob'ekt tarkibidagi radioaktiv moddalar o'zlarini suratga olayotganga o'xshaydi (shuning uchun nom). A. usuli fizika va texnikada, biologiya va tibbiyotda - izotop izlagichlar qoʻllaniladigan hamma joyda keng qoʻllaniladi. Fotografik emulsiyani ishlab chiqish va mahkamlashdan so'ng, unda o'rganilayotgan taqsimotni aks ettiruvchi tasvir olinadi. Ob'ektga fotografik emulsiya qo'llashning bir necha usullari mavjud. Namunaning sayqallangan yuzasiga fotosurat plitasi to'g'ridan-to'g'ri qo'llanilishi mumkin yoki namunaga iliq suyuqlik emulsiyasi qo'llanilishi mumkin, u qotib qolganda namunaga mahkam yondosh qatlam hosil qiladi va ekspozitsiya va fotosuratga ishlov berishdan keyin tekshiriladi. Radioaktiv moddalarning tarqalishi sinov va mos yozuvlar namunasidan (makroradiografiya deb ataladigan) plyonkaning qorayish zichligini solishtirish orqali o'rganiladi. Ikkinchi usul optik yoki elektron mikroskop (mikroradiografiya) yordamida fotografik emulsiyadagi ionlashtiruvchi zarrachalar hosil qilgan izlarni sanashdan iborat. Bu usul birinchisiga qaraganda ancha sezgir. Makroavtograflarni olish uchun shaffoflik va rentgen emulsiyalari, mikroavtograflar uchun esa maxsus nozik taneli emulsiyalardan foydalaniladi. Oʻrganilayotgan obʼyektda radioaktiv moddalarning tarqalishining A. usulida olingan foto tasviri avtoradiogramma yoki radioavtograf deb ataladi. Ustida guruch. 12
va 3
avtoradiogrammalarga misollar keltiriladi. A. usuli turli rudalarda radioaktiv elementlarning borligini, oʻsimlik va hayvon organizmlari toʻqimalarida tabiiy radioaktiv elementlarning tarqalishini va hokazolarni aniqlash mumkin. Radioizotoplar bilan yorliqlangan birikmalarning organizmga kiritilishi va toʻqimalar va hujayralarni A. usulida qoʻshimcha tekshirish muayyan jarayonlar sodir boʻladigan, maʼlum moddalar lokalizatsiya qilingan, maʼlum hujayralar yoki hujayra tuzilmalari toʻgʻrisida aniq maʼlumotlarni olish imkonini beradi. bir qator jarayonlarning vaqt parametrlarini belgilash. Demak, masalan, radioaktiv fosfor va A.dan foydalanish oʻsayotgan suyakda intensiv metabolizm mavjudligini aniqlash imkonini berdi; radioyod va A.dan foydalanish qalqonsimon bezning faoliyat shakllarini aniqlashtirishga imkon berdi; etiketli birikmalar - oqsil va nuklein kislotalarning prekursorlari kiritilishi va A. bu muhim birikmalar almashinuvida ma'lum hujayrali tuzilmalarning rolini tushunishga yordam berdi. A. usuli biologik obyektda radioizotopning lokalizatsiyasinigina emas, balki uning miqdorini ham aniqlash imkonini beradi, chunki emulsiyadagi kumushning qaytarilgan donalarining soni unga taʼsir etuvchi zarrachalar soniga mutanosib boʻladi. Makroavtograflarning miqdoriy tahlili odatiy fotometriya usullari bilan amalga oshiriladi (Qarang: Fotometriya) ,
va mikroavtograflar - ionlashtiruvchi zarrachalar ta'sirida emulsiyada paydo bo'lgan kumush donalari yoki izlarni mikroskop ostida hisoblash orqali. A. elektron mikroskopiya bilan muvaffaqiyatli birlasha boshlaydi (Qarang: Elektron mikroskop). Shuningdek, rentgenografiyaga qarang. Lit.: Boyd D. A. Biologiya va tibbiyotda avtoradiografiya, trans. ingliz tilidan, M., 1957; Jinkin L. N., Gistologiyada radioaktiv izotoplardan foydalanish, kitobda: Gistologiyada radiotraserlar, L., 1959, s. 5-33; Perry R., Miqdoriy avtoradiografiya, Hujayra fiziologiyasi usullari, 1964, v. I, ch. 15, p. 305-26. N. G. Xrushchov. Guruch. 2. Pomidor barglarida fosforning (32 P) tarqalishini ko'rsatadigan avtoradiogramma (chop etish). O'simlik ilgari radioaktiv fosforli eritma ichiga joylashtirilgan. Yorug'lik joylari radioaktiv izotopning yuqori konsentratsiyasiga to'g'ri keladi; fosforning barglarning poya va tomir qismlarida to‘planganini ko‘rish mumkin. Guruch. 1. Nikel namunasining mikroradiogrammasi. Nikelda 113 Sn radioaktiv izotopi bilan belgilangan qalayning tarqalishi o'rganiladi. Radioaktiv qalayning tarqalishi shuni ko'rsatadiki, diffuziya asosan nikelning don chegaralari bo'ylab sodir bo'ladi.
Buyuk Sovet Entsiklopediyasi. - M.: Sovet Entsiklopediyasi. 1969-1978 .
Sinonimlar:Boshqa lug'atlarda "Avtoradiografiya" nima ekanligini ko'ring:
- (avto ... va rentgenografiyadan) ob'ektda radioaktiv moddalarning tarqalishini qayd etish usuli. Sirtga (kesilgan) nurlanishga sezgir emulsiyaga ega bo'lgan plyonka qo'llaniladi. Radioaktiv moddalar go'yo o'zlarini suratga olishadi ... ... Katta ensiklopedik lug'at
- (radioavtografiya), radioaktning tarqalishini o'lchash usuli. c c o'rganilayotgan ob'ektda (o'z nurlanishiga ko'ra), uning ustiga yadroviy fotografik emulsiya qatlamini qo'llashdan iborat. Tarqatish rivojlangan qorayish zichligi bilan belgilanadi ... ... Jismoniy entsiklopediya
O'rganilayotgan ob'ekt yoki birikmalarda radioaktiv moddalarning (izotoplarning) tarqalishini o'rganish usuli. Bu ob'ektga (yoki, masalan, xromatogrammaga) radioaktiv nurlanishga sezgir bo'lgan fotografik emulsiyani qo'yish va iz olishdan iborat, ... ... Mikrobiologiya lug'ati
Mavjud., sinonimlar soni: 4 avtoradiografiya (2) makroautorradiografiya (1) ... Sinonim lug'at
Avtoradiografiya. Radioavtografga qarang. (Manba: "Genetik atamalarning inglizcha ruscha tushuntirish lug'ati". Arefiev V.A., Lisovenko L.A., Moskva: VNIRO nashriyoti, 1995 yil) ... Molekulyar biologiya va genetika. Izohli lug'at.
avtoradiografiya- radioaktning tarqalishini o'rganish usuli. o'rganilayotgan namunadagi komponentlar radioaktiv aktga sezgir bo'lgan namunaga o'z nurlanishi bilan ta'sir qiladi. emulsiya nurlanishi. Tarqatish rivojlangan qorayish zichligi bilan belgilanadi ... ... Texnik tarjimon uchun qo'llanma
Avtoradiografiya- * avtoradiografiya * avtoradiografiya qarang ... Genetika. ensiklopedik lug'at
- (avto ... va rentgenografiyadan), ob'ektdagi radioaktiv moddalarning tarqalishini qayd etish usuli. Sirtga (kesilgan) nurlanishga sezgir emulsiyaga ega bo'lgan plyonka qo'llaniladi. Radioaktiv moddalar go'yo o'zlarini suratga olishadi ... ... ensiklopedik lug'at
Kitoblar
- Biologiya va tibbiyotda avtoradiografiya, J. Boyd, Kitob avtoradiografiya usulini yaratuvchilardan biriga tegishli. Birinchi sakkiz bob savol nazariyasiga bag'ishlangan. Ular fotografik jarayonning nazariyasini, xususiyatlari va xususiyatlarini ko'rib chiqadilar ... Kategoriya: Tibbiyot bilimlari asoslari Nashriyot:
Radio avtorografiyasi nisbatan yangi usul bo'lib, yorug'lik va elektron mikroskopiya imkoniyatlarini sezilarli darajada kengaytirdi. Bu juda zamonaviy usul bo'lib, yadro fizikasining rivojlanishi tufayli turli xil elementlarning radioaktiv izotoplarini olish imkonini berdi. Radioavtografiya uchun, xususan, hujayra tomonidan ishlatiladigan yoki hujayra tomonidan ishlatiladigan moddalar bilan bog'lanishi mumkin bo'lgan va hayvonlarga yuborilishi yoki normal hujayra metabolizmiga xalaqit bermaydigan miqdorda kulturalarga qo'shilishi mumkin bo'lgan elementlarning izotoplari. Radioaktiv izotop (yoki u bilan belgilangan modda) biokimyoviy reaktsiyalarda xuddi radioaktiv bo'lmagan hamkasbi kabi ishtirok etganligi va shu bilan birga radiatsiya chiqaradiganligi sababli, tanadagi izotoplarning yo'lini aniqlashning turli usullari yordamida kuzatish mumkin. radioaktivlik. Radioaktivlikni aniqlash usullaridan biri uning yorug'lik kabi fotografik plyonkada harakat qilish qobiliyatiga asoslanadi; ammo radioaktiv nurlanish plyonkani yorug'likdan himoya qilish uchun ishlatiladigan qora qog'ozga kirib boradi va filmga yorug'lik kabi ta'sir qiladi.
Yorug'lik yoki elektron mikroskoplar yordamida o'rganish uchun mo'ljallangan preparatlarda radioaktiv izotoplar chiqaradigan nurlanishni aniqlay olish uchun preparatlar qorong'i xonada maxsus fotografik emulsiya bilan qoplanadi, shundan so'ng ular qorong'ida bir muddat qoldiriladi. Keyin slaydlar ishlab chiqiladi (shuningdek, qorong'ida) va o'rnatiladi. Preparatning radioaktiv izotoplari bo'lgan joylari ularning ustida joylashgan emulsiyaga ta'sir qiladi, ularda chiqarilgan nurlanish ta'sirida quyuq "donalar" paydo bo'ladi. Shunday qilib, ular radio avtograflarini olishadi (yunon tilidan. radio- nurli avtomashinalar- o'zi va grafo- yozing).
Dastlab, gistologlar faqat bir nechta radioaktiv izotoplarga ega edi; masalan, avtoradiografiyadan foydalangan holda ko'plab dastlabki tadqiqotlar radioaktiv fosfordan foydalangan. Keyinchalik bu izotoplardan ko'proq foydalanilgan; Vodorodning radioaktiv izotopi tritiy ayniqsa keng qo'llanilgan.
Avtoradiografiya tanadagi ma'lum biokimyoviy reaktsiyalar qayerda va qanday sodir bo'lishini o'rganish uchun juda keng qo'llanilgan va hozir ham qo'llaniladi.
Biologik jarayonlarni o'rganish uchun ishlatiladigan radioaktiv izotoplar bilan belgilangan kimyoviy birikmalar prekursorlar deb ataladi. Prekursorlar odatda organizm oziq-ovqatdan oladigan moddalarga o'xshash moddalardir; ular to'qimalarni qurish uchun qurilish bloklari bo'lib xizmat qiladi va hujayralar va to'qimalarning murakkab tarkibiy qismlariga xuddi etiketlanmagan qurilish bloklari kiritilgani kabi kiradi. Belgilangan prekursor kiritilgan va radiatsiya chiqaradigan to'qima komponenti mahsulot deb ataladi.
Madaniyatda o'stirilgan hujayralar, bir xil turdagi bo'lsa-da, ularning tsikllarini sinxronlashtirishga alohida e'tibor berilmasa, har qanday vaqtda hujayra siklining turli bosqichlarida bo'ladi. Biroq, tritium-timidinni hujayralarga yuborish va keyin avtograflar qilish orqali tsiklning turli bosqichlarining davomiyligini aniqlash mumkin. Bir bosqich - mitozning boshlanish vaqtini timidin bilan belgilanmagan holda aniqlash mumkin. Buning uchun kulturadan olingan hujayralar namunasi fazali kontrastli mikroskopda kuzatuv ostida saqlanadi, bu mitoz jarayonini bevosita kuzatish va uning vaqtini belgilash imkonini beradi. Mitozning davomiyligi odatda 1 soatni tashkil qiladi, garchi ba'zi hujayralarda bu 1,5 soatgacha davom etadi.
Radio avtorografiya usuli
Radio avtografiyasi, ta'rifi, tarixi.
Avtoradiografiya usuli o'rganilayotgan ob'ektga radioaktiv atom bilan "yorliqlangan" birikmani kiritish va nurlanishni fotografik ro'yxatga olish yo'li bilan uning kiritilgan joyini aniqlashga asoslangan. Tasvirni olish uchun asos bo'lib, radioaktiv atomning parchalanishi paytida hosil bo'lgan ionlashtiruvchi zarrachalarning kumush galogenid kristallari bo'lgan yadro fotoemulsiyasiga ta'siri.
Avtoradiografiya usulining kashf etilishi radioaktivlik hodisasining ochilishi bilan bevosita bog'liq. 1867 yilda uran tuzlarining kumush galogenidlariga ta'siri bo'yicha birinchi kuzatish nashr etildi (Niepce de St.Victor). 1896 yilda Genri Bekkerel uran tuzlari bilan fotoplastinkaning yorug'likka oldindan ta'sir qilmasdan yoritilishini kuzatdi. Ushbu eksperiment radioaktivlik hodisasini kashf qilish momenti hisoblanadi. Biologik materialga qo'llaniladigan avtoradiografiya birinchi marta 1920-yillarda Lacassagne va Lattes (Lacassagne, Lattes 1924) tomonidan ishlatilgan; hayvonlarning turli organlaridan olingan gistologik blok izotoplar kiritilgandan so'ng rentgen plitasiga tekis tomoni bilan bosilib, ochiladi. Oldindan gistologik bo'lim tayyorlandi va standart bo'yash jarayoniga duchor bo'ldi. Olingan avtograf kesimdan alohida o'rganildi. Bu usul biologik namunaga izotop qo'shilish intensivligini baholash imkonini beradi. 1940-yillarda Leblond qalqonsimon bez boʻlimlarida yod izotopining tarqalishini koʻrsatish uchun avtoradiografiyadan foydalangan (Leblond C.P. 1943).
Avtoradiografiyani elektron mikroskopiya bilan birlashtirishga birinchi urinishlar 1950-yillarda qilingan (Liquir-Milward, 1956). Elektron mikroskopik avtoradiografiya an'anaviy avtoradiografiyaning alohida holati bo'lib, unda kumush donalari ham hisobga olinadi va ularning taqsimlanishi hisobga olinadi. Usulning o'ziga xos xususiyati emulsiyaning juda nozik qatlamidan foydalanishdir. Hozirgi vaqtda taxminan 50 nm o'lchamlariga erishildi, bu yorug'lik mikroskopiga qaraganda 10-20 baravar yuqori.
Hozirgi vaqtda avtoradiografiya usuli video analizatorlar yordamida kumush donalarining sonini avtomatik ravishda baholash imkoniyati bilan to'ldirildi. Ko'pincha, teg signalini kuchaytirish uchun (qoida tariqasida, bu yuqori energiyali izotoplar), har xil turdagi sintillyatorlar qo'llaniladi, ular plitalarga joylashtiriladi (fosfor bilan qoplangan kuchaytiruvchi ekran) yoki emulsiyaga (PPO) singdiriladi - bu holda , foton emissiyasi an'anaviy fotografik plastinka yoki plyonkani yoritadi.
Rasmni olishning fotografik printsipi, fotografik emulsiya
Radiografik tadqiqotda yadroviy parchalanish detektorining rolini fotografik emulsiya bajaradi, unda ionlashtiruvchi zarracha o'tganda yashirin tasvir qoladi, keyinchalik u oddiy fotografik plyonkani qayta ishlashga o'xshab rivojlanish jarayonida namoyon bo'ladi.
Fotoemulsiya - jelatin tarkibidagi kumush galoid mikrokristallarining suspenziyasi. Mikrokristallarda sezgirlik markazlari deb ataladigan strukturaviy nuqsonlar mavjud. Gurney-Mott modeliga ko'ra, kristallning ion panjarasidagi bu buzilishlar alfa yoki beta zarralari kristalning o'tkazuvchanlik zonasidan o'tganda ajralib chiqadigan elektronlarni ushlab turishga qodir, buning natijasida ion atomga aylanadi. . Olingan yashirin tasvirni faollashtirilgan kumush galogenid kristallarini metall kumush donalariga aylantiruvchi protsedura yordamida aniqlash mumkin (bu jarayon kimyoviy rivojlanish deb ataladi). Ishlab chiqaruvchi sifatida etarli darajada kamaytiruvchi faollikka ega bo'lgan har qanday vositadan foydalanish mumkin (odatda, fotografiya va avtoradiografiyada metol, amidol yoki gidroxinon ishlatiladi). Ochiq kristallar ta'sir qilgandan so'ng, qolgan kumush galogenid mikrokristallari emulsiyadan fiksator (odatda giposulfit) bilan chiqariladi. Yadro fotografik emulsiyalari rezolyutsiya (don) va sezgirlik bilan tavsiflanadi. Birinchisi kumush tuzi mikrokristallarining kattaligi bilan aniqlanadi va ikkinchisiga teskari proportsionaldir. Fotografik emulsiya ko'rinadigan yorug'likka nisbatan sezgirlikning pasayishi bilan tavsiflanadi, ammo u bilan ishlash artefaktlarning ko'rinishini istisno qilish uchun qorong'ida bajarilishi kerak.
Emulsiya preparatga substrat bilan tayyor plyonka shaklida yoki preparatni qizdirilgan suyuqlik emulsiyasiga botirish orqali qo'llanilishi mumkin - bu bilan odatdagi tarzda ishlab chiqilgan nozik bir tekis qatlam olinadi. Yorug'lik mikroskopi uchun emulsiyani qo'llashdan oldin, slayd odatda kerakli gistologik bo'yoq bilan bo'yaladi, lekin odatdagidan ko'ra rangparroq bo'lib, barcha sohalarda kumush donalarini hisoblash imkonini beradi. Preparat ma'lum vaqt davomida ta'sir qiladi, keyin u ishlab chiqiladi.
Avtoradiografiyada ishlatiladigan izotoplar.
Avtoradiografiyada tadqiqot maqsadlari va mavjud materiallarga qarab turli xil izotoplardan foydalanish mumkin. Yadro fotografik emulsiyasida ionlashtiruvchi zarracha tomonidan yaratilgan tasvir zarrachaning energiyasiga va uning modda bilan o'zaro ta'sir qilish turiga bog'liq.
Bir xil radioaktiv yadrolar chiqaradigan alfa zarralari bir xil energiyaga ega ( E) va bir xil yo'l uzunligi ( R) , quyidagi munosabat bilan bog'langan:
R = kE3/2
Qayerda k – zarrachalar tarqaladigan muhitni tavsiflovchi doimiy. Yurakdagi zarrachalar diapazoni uning zichligi va elementar tarkibi bilan belgilanadi. Bragg-Klymen munosabati atom massasi A va zichlikdagi havodagi alfa zarrachalari diapazoni (R0) bo'yicha moddaning diapazonini baholashga imkon beradi. d:
R= 0,0003 (R0 / d) A1/2
Alfa zarralarining ionlashtiruvchi kuchi juda yuqori bo'lganligi sababli, bu izotop taqsimotini fotografik ro'yxatga olishni osonlashtiradi, shuningdek, ro'yxatga olish uchun emulsiya bo'lmagan materiallardan foydalanishga imkon beradi. Bitta manba tomonidan chiqarilgan alfa zarrachalarining izi, avtograflarda, odatda 15-50 mikron uzunlikdagi, bir nuqtadan chiqadigan tekis segmentlar nuriga o'xshaydi, bu sizga radioaktiv yorliq qo'shilgan joyni aniq lokalizatsiya qilishga imkon beradi. Biroq, alfa zarralari katta atom raqamlariga ega bo'lgan izotoplar tomonidan chiqariladi, bu ularning biologik belgi sifatida ishlatilishini cheklaydi.
Alfa zarrachalarining izlari ko'pincha gistologik rentgenogrammalarda artefakt sifatida kuzatiladi - shisha slayddagi izotoplarning o'z-o'zidan nurlanishi natijasi.
Beta-nurlanish zarrachalarning boshlang'ich energiyasining uzluksiz spektri bilan tavsiflanadi - har bir izotop uchun aniqlangan noldan E maxgacha. Spektrning shakllari sezilarli darajada farqlanadi. Shunday qilib, tritem tomonidan chiqariladigan zarrachalarning eng ehtimoliy energiyasi E max ning 1/7 qismi, 14C - taxminan ¼, 32P - taxminan 1/3. Har xil izotoplarning beta nurlanishining maksimal energiyasi 18 keV dan 3,5 MeV gacha - alfa nurlanishiga qaraganda ancha kengroq diapazonda o'zgarib turadi. Qoidaga ko'ra, qisqa muddatli izotoplar uchun maksimal energiya yuqori bo'ladi.
Beta-zarralar va monoenergetik elektronlarning materiyadan o'tishi o'zaro ta'sirning ikkita asosiy turi bilan birga keladi. Orbitadagi elektron bilan o'zaro ta'sirlashganda, zarracha unga atomni ionlashtirish uchun etarli energiyani o'tkazishi mumkin (elektronni orbitadan olib tashlash). Kamdan kam hollarda, bu energiya shunchalik yuqoriki, chiqarilgan elektronning yo'lini kuzatish mumkin. Zarracha va elektron massalarining tengligi tufayli dastlabki harakatdan chetlanish mavjud. Ikkinchi turdagi atom yadrolari bilan o'zaro ta'siri bremsstrahlung rentgen nurlarining paydo bo'lishiga olib keladi. Ikkinchisi emulsiya tomonidan qayd etilmagan bo'lsa-da, zarrachaning yadro bilan o'zaro ta'sirini traektoriyadagi keskin tanaffus bilan aniqlash mumkin.
Orbitadagi elektronlar bilan qayta-qayta o'zaro ta'sir qilish traektoriyaning egriligiga olib keladi, bu odatda o'rash chizig'iga o'xshaydi, ayniqsa oxirgi qismida, zarracha tezligi pasayganda va ionlashtiruvchi quvvat kuchayadi. Traektoriya uzunligi trekning boshidan oxirigacha bo'lgan masofadan sezilarli darajada oshadi - yugurish. Shu sababli, hatto monoenergetik elektronlar ham yuqoridan R max bilan cheklangan diapazonlarning mavjudligi bilan tavsiflanadi, bu nurlanish uchun xosdir. Ionlanish yo'qotishlari past bo'lganligi sababli, beta zarralarini aniqlash alfa zarrachalariga qaraganda qiyinroq. Ular uzluksiz izlar hosil qilmaydi (tritiyning eng yumshoq nurlanishidan tashqari - ammo, bu holda, bir nechta emulsiya kristalidan o'tish ehtimoli kichik), rivojlangan kristallarning zichligi va soni turli chegaralarda o'zgaradi. Boshqa elementdagi beta zarracha diapazoni quyidagi formula bo'yicha baholanishi mumkin:
R = RA1 (Z/A)A1/ (Z/A)
E ning keng ko'lamli qiymatlarida maks Maksimal masofa maksimal energiya bilan bog'liq:
R m= 412 E maks 1,265 - 0,0954 lnE maks
Turli energiyaga ega bo'lgan zarralar uchun ishlab chiqilgan emulsiya kristallarining diapazonlaridagi farq, ionlash qobiliyati va zichligi, agar ularning izotoplari tritiy va 14C holatlarida bo'lgani kabi, E maxda sezilarli darajada farq qilsa, elementlarning taqsimlanishini farqlash uchun ishlatilishi mumkin. Ikki izotopning taqsimlanishini diskriminatsiya qilish namunaga ikkita emulsiya qatlamini qo'llash orqali amalga oshiriladi, birinchi qatlam asosan yumshoq nurlanishni qayd etadi, ikkinchisi - qattiq. Ba'zi ishlarga ko'ra, turli xil izotoplar ishlab chiqilgan emulsiya kristallari hajmidan ishonchli tarzda ajratilishi mumkin - yuqori ionlash kuchiga ega tritiyning beta zarrasi ta'sirlangan kristallar kattaroqdir.
Ichki konversion elektronlar juda kam nurlanish energiyasiga ega boʻlgan gamma kvant yutilganda va elektron atomning ichki qobigʻidan chiqarilganda hosil boʻladi. Bu elektronlar yumshoq beta zarrachalariga o'xshaydi, ammo ikkinchisidan farqli o'laroq, ular monoenergetikdir. Ichki konversion elektronlarning mavjudligi 125I kabi izotoplardan foydalanishga imkon beradi.
Hozirgi vaqtda beta zarralarini chiqaradigan eng ko'p ishlatiladigan izotoplar. Qoida tariqasida, tritiy gistologik tadqiqotlarda etiketkalash uchun ishlatiladi. Tritiydan foydalangan holda birinchi avtograflar 1950-yillarda qilingan (Fitzgerald va boshq. 1951), ammo uning keng qo'llanilishi Brukhaven laboratoriyasida tritiy bilan belgilangan timidin olinganidan keyin boshlangan. Vodorod barcha organik moddalarning bir qismi bo'lganligi sababli, tritiy yordamida siz radioaktiv yorlig'i bo'lgan turli xil birikmalarni olishingiz mumkin. Chiqarilgan zarrachaning energiyasi qanchalik past bo'lsa, fotografik emulsiyada harakatlanayotganda uning qoldirgan yo'li shunchalik qisqaroq bo'ladi va teglangan atomning joylashishini aniqroq aniqlash mumkin bo'ladi. Tritiy beta zarralarining yo'l uzunligi taxminan 1-2 mkm, eng ehtimolli energiya 0,005 MeV ni tashkil qiladi va yo'l ko'p hollarda bitta kumush donasidan iborat bo'lib, bu nurlanish manbasini nafaqat nisbatan katta hujayralarda lokalizatsiya qilishga imkon beradi. yadro kabi tuzilmalar, balki alohida xromosomalarda ham.
Organizmga "yorliqlangan" metabolitlarning kiritilishi izotopning hayvon to'qimalarining hujayralariga kiritilishini kuzatish imkonini beradi, bu esa tirik organizmdagi turli xil biokimyoviy jarayonlarni o'rganish imkonini beradi.
Mutlaq ma'lumotlarni olish - o'rganilayotgan ob'ektdagi etiketli moddaning kontsentratsiyasi kamdan-kam hollarda radioavtografik tadqiqotning maqsadi hisoblanadi, buning uchun bir qator shartlarni bilish kerak, ularni aniqlash qiyin. Shuning uchun miqdoriy radioavtografik tadqiqotlar odatda sinov ob'ekti va nazorat ustidagi kumush donalarining kontsentratsiyasini taqqoslash yo'li bilan amalga oshiriladi, nazorat ma'lumotlari esa qulay tarzda bitta yoki 100% sifatida olinadi.
Amaldagi ayrim izotoplarning xarakteristikalari
biologik ob'ektlarning radioavtografiyasida
Radio avtorografiya usuli
Radio avtografiyasi, ta'rifi, tarixi.
Avtoradiografiya usuli o'rganilayotgan ob'ektga radioaktiv atom bilan "yorliqlangan" birikmani kiritish va nurlanishni fotografik ro'yxatga olish yo'li bilan uning kiritilgan joyini aniqlashga asoslangan. Tasvirni olish uchun asos bo'lib, radioaktiv atomning parchalanishi paytida hosil bo'lgan ionlashtiruvchi zarrachalarning kumush galogenid kristallari bo'lgan yadro fotoemulsiyasiga ta'siri.
Avtoradiografiya usulining kashf etilishi radioaktivlik hodisasining ochilishi bilan bevosita bog'liq. 1867 yilda uran tuzlarining kumush galogenidlariga ta'siri bo'yicha birinchi kuzatish nashr etildi (Niepce de St.Victor). 1896 yilda Genri Bekkerel uran tuzlari bilan fotoplastinkaning yorug'likka oldindan ta'sir qilmasdan yoritilishini kuzatdi. Ushbu eksperiment radioaktivlik hodisasini kashf qilish momenti hisoblanadi. Biologik materialga qo'llaniladigan avtoradiografiya birinchi marta 1920-yillarda Lacassagne va Lattes (Lacassagne, Lattes 1924) tomonidan ishlatilgan; hayvonlarning turli organlaridan olingan gistologik blok izotoplar kiritilgandan so'ng rentgen plitasiga tekis tomoni bilan bosilib, ochiladi. Oldindan gistologik bo'lim tayyorlandi va standart bo'yash jarayoniga duchor bo'ldi. Olingan avtograf kesimdan alohida o'rganildi. Bu usul biologik namunaga izotop qo'shilish intensivligini baholash imkonini beradi. 1940-yillarda Leblond qalqonsimon bez boʻlimlarida yod izotopining tarqalishini koʻrsatish uchun avtoradiografiyadan foydalangan (Leblond C.P. 1943).
Avtoradiografiyani elektron mikroskopiya bilan birlashtirishga birinchi urinishlar 1950-yillarda qilingan (Liquir-Milward, 1956). Elektron mikroskopik avtoradiografiya an'anaviy avtoradiografiyaning alohida holati bo'lib, unda kumush donalari ham hisobga olinadi va ularning taqsimlanishi hisobga olinadi. Usulning o'ziga xos xususiyati emulsiyaning juda nozik qatlamidan foydalanishdir. Hozirgi vaqtda taxminan 50 nm o'lchamlariga erishildi, bu yorug'lik mikroskopiga qaraganda 10-20 baravar yuqori.
Hozirgi vaqtda avtoradiografiya usuli video analizatorlar yordamida kumush donalarining sonini avtomatik ravishda baholash imkoniyati bilan to'ldirildi. Ko'pincha, teg signalini kuchaytirish uchun (qoida tariqasida, bu yuqori energiyali izotoplar), har xil turdagi sintillyatorlar qo'llaniladi, ular plitalarga joylashtiriladi (fosfor bilan qoplangan kuchaytiruvchi ekran) yoki emulsiyaga (PPO) singdiriladi - bu holda , foton emissiyasi an'anaviy fotografik plastinka yoki plyonkani yoritadi.
Rasmni olishning fotografik printsipi, fotografik emulsiya
Radiografik tadqiqotda yadroviy parchalanish detektorining rolini fotografik emulsiya bajaradi, unda ionlashtiruvchi zarracha o'tganda yashirin tasvir qoladi, keyinchalik u oddiy fotografik plyonkani qayta ishlashga o'xshab rivojlanish jarayonida namoyon bo'ladi.
Fotoemulsiya - jelatin tarkibidagi kumush galoid mikrokristallarining suspenziyasi. Mikrokristallarda sezgirlik markazlari deb ataladigan strukturaviy nuqsonlar mavjud. Gurney-Mott modeliga ko'ra, kristallning ion panjarasidagi bu buzilishlar alfa yoki beta zarralari kristalning o'tkazuvchanlik zonasidan o'tganda ajralib chiqadigan elektronlarni ushlab turishga qodir, buning natijasida ion atomga aylanadi. . Olingan yashirin tasvirni faollashtirilgan kumush galogenid kristallarini metall kumush donalariga aylantiruvchi protsedura yordamida aniqlash mumkin (bu jarayon kimyoviy rivojlanish deb ataladi). Ishlab chiqaruvchi sifatida etarli darajada kamaytiruvchi faollikka ega bo'lgan har qanday vositadan foydalanish mumkin (odatda, fotografiya va avtoradiografiyada metol, amidol yoki gidroxinon ishlatiladi). Ochiq kristallar ta'sir qilgandan so'ng, qolgan kumush galogenid mikrokristallari emulsiyadan fiksator (odatda giposulfit) bilan chiqariladi. Yadro fotografik emulsiyalari rezolyutsiya (don) va sezgirlik bilan tavsiflanadi. Birinchisi kumush tuzi mikrokristallarining kattaligi bilan aniqlanadi va ikkinchisiga teskari proportsionaldir. Fotografik emulsiya ko'rinadigan yorug'likka nisbatan sezgirlikning pasayishi bilan tavsiflanadi, ammo u bilan ishlash artefaktlarning ko'rinishini istisno qilish uchun qorong'ida bajarilishi kerak.
Emulsiya preparatga substrat bilan tayyor plyonka shaklida yoki preparatni qizdirilgan suyuqlik emulsiyasiga botirish orqali qo'llanilishi mumkin - bu bilan odatdagi tarzda ishlab chiqilgan nozik bir tekis qatlam olinadi. Yorug'lik mikroskopi uchun emulsiyani qo'llashdan oldin, slayd odatda kerakli gistologik bo'yoq bilan bo'yaladi, lekin odatdagidan ko'ra rangparroq bo'lib, barcha sohalarda kumush donalarini hisoblash imkonini beradi. Preparat ma'lum vaqt davomida ta'sir qiladi, keyin u ishlab chiqiladi.
Avtoradiografiyada ishlatiladigan izotoplar.
Avtoradiografiyada tadqiqot maqsadlari va mavjud materiallarga qarab turli xil izotoplardan foydalanish mumkin. Yadro fotografik emulsiyasida ionlashtiruvchi zarracha tomonidan yaratilgan tasvir zarrachaning energiyasiga va uning modda bilan o'zaro ta'sir qilish turiga bog'liq.
Bir xil radioaktiv yadrolar chiqaradigan alfa zarralari bir xil energiyaga ega ( E) va bir xil yo'l uzunligi ( R) , quyidagi munosabat bilan bog'langan:
R = kE 3/2
Qayerda k – zarrachalar tarqaladigan muhitni tavsiflovchi doimiy. Yurakdagi zarrachalar diapazoni uning zichligi va elementar tarkibi bilan belgilanadi. Bragg-Klymen munosabati havodagi alfa zarrachalarining diapazoni (R 0) bo'yicha atom massasi A va zichlikka ega bo'lgan moddadagi diapazonni baholashga imkon beradi. d:
R= 0,0003 (R0 / d) 1/2
Alfa zarralarining ionlashtiruvchi kuchi juda yuqori bo'lganligi sababli, bu izotop taqsimotini fotografik ro'yxatga olishni osonlashtiradi, shuningdek, ro'yxatga olish uchun emulsiya bo'lmagan materiallardan foydalanishga imkon beradi. Bitta manba tomonidan chiqarilgan alfa zarrachalarining izi, avtograflarda, odatda 15-50 mikron uzunlikdagi, bir nuqtadan chiqadigan tekis segmentlar nuriga o'xshaydi, bu sizga radioaktiv yorliq qo'shilgan joyni aniq lokalizatsiya qilishga imkon beradi. Biroq, alfa zarralari katta atom raqamlariga ega bo'lgan izotoplar tomonidan chiqariladi, bu ularning biologik belgi sifatida ishlatilishini cheklaydi.
Alfa zarrachalarining izlari ko'pincha gistologik rentgenogrammalarda artefakt sifatida kuzatiladi - shisha slayddagi izotoplarning o'z-o'zidan nurlanishi natijasi.
Beta-zarralar va monoenergetik elektronlarning materiyadan o'tishi o'zaro ta'sirning ikkita asosiy turi bilan birga keladi. Orbitadagi elektron bilan o'zaro ta'sirlashganda, zarracha unga atomni ionlashtirish uchun etarli energiyani o'tkazishi mumkin (elektronni orbitadan olib tashlash). Kamdan kam hollarda, bu energiya shunchalik yuqoriki, chiqarilgan elektronning yo'lini kuzatish mumkin. Zarracha va elektron massalarining tengligi tufayli dastlabki harakatdan chetlanish mavjud. Ikkinchi turdagi atom yadrolari bilan o'zaro ta'siri bremsstrahlung rentgen nurlarining paydo bo'lishiga olib keladi. Ikkinchisi emulsiya tomonidan qayd etilmagan bo'lsa-da, zarrachaning yadro bilan o'zaro ta'sirini traektoriyadagi keskin tanaffus bilan aniqlash mumkin.
Orbitadagi elektronlar bilan qayta-qayta o'zaro ta'sir qilish traektoriyaning egriligiga olib keladi, bu odatda o'rash chizig'iga o'xshaydi, ayniqsa oxirgi qismida, zarracha tezligi pasayganda va ionlashtiruvchi quvvat kuchayadi. Traektoriya uzunligi trekning boshidan oxirigacha bo'lgan masofadan sezilarli darajada oshadi - yugurish. Shu sababli, hatto monoenergetik elektronlar ham yuqoridan R max bilan cheklangan diapazonlarning mavjudligi bilan tavsiflanadi, bu nurlanish uchun xosdir. Ionlanish yo'qotishlari past bo'lganligi sababli, beta zarralarini aniqlash alfa zarrachalariga qaraganda qiyinroq. Ular uzluksiz izlar hosil qilmaydi (tritiyning eng yumshoq nurlanishidan tashqari - ammo, bu holda, bir nechta emulsiya kristalidan o'tish ehtimoli kichik), rivojlangan kristallarning zichligi va soni turli chegaralarda o'zgaradi. Boshqa elementdagi beta zarracha diapazoni quyidagi formula bo'yicha baholanishi mumkin:
R = R A1 (Z/A) A1 / (Z/A)
E ning keng ko'lamli qiymatlarida maks Maksimal masofa maksimal energiya bilan bog'liq:
R m= 412 E maks 1,265 - 0,0954 lnE maks
Turli energiyaga ega bo'lgan zarralar uchun ishlab chiqilgan emulsiya kristallarining diapazonlari, ionlash qobiliyati va zichligi farqi, agar ularning izotoplari tritiy va 14 S dagi kabi E maxda sezilarli darajada farq qilsa, elementlarning taqsimlanishini farqlash uchun ishlatilishi mumkin. ikkita izotopning taqsimlanishi ikkita emulsiya qatlami namunasiga qo'llash orqali amalga oshiriladi, birinchi qatlam asosan yumshoq nurlanishni qayd etadi, ikkinchisi - qattiq. Ba'zi ishlarga ko'ra, turli xil izotoplar ishlab chiqilgan emulsiya kristallari hajmidan ishonchli tarzda ajratilishi mumkin - yuqori ionlash kuchiga ega tritiyning beta zarrasi ta'sirlangan kristallar kattaroqdir.
Ichki konversion elektronlar juda kam nurlanish energiyasiga ega boʻlgan gamma kvant yutilganda va elektron atomning ichki qobigʻidan chiqarilganda hosil boʻladi. Bu elektronlar yumshoq beta zarrachalariga o'xshaydi, ammo ikkinchisidan farqli o'laroq, ular monoenergetikdir. Ichki konversion elektronlarning mavjudligi 125 I kabi izotoplardan foydalanishga imkon beradi.
Hozirgi vaqtda beta zarralarini chiqaradigan eng ko'p ishlatiladigan izotoplar. Qoida tariqasida, tritiy gistologik tadqiqotlarda etiketkalash uchun ishlatiladi. Tritiydan foydalangan holda birinchi avtograflar 1950-yillarda qilingan (Fitzgerald va boshq. 1951), ammo uning keng qo'llanilishi Brukhaven laboratoriyasida tritiy bilan belgilangan timidin olinganidan keyin boshlangan. Vodorod barcha organik moddalarning bir qismi bo'lganligi sababli, tritiy yordamida siz radioaktiv yorlig'i bo'lgan turli xil birikmalarni olishingiz mumkin. Chiqarilgan zarrachaning energiyasi qanchalik past bo'lsa, fotografik emulsiyada harakatlanayotganda uning qoldirgan yo'li shunchalik qisqaroq bo'ladi va teglangan atomning joylashishini aniqroq aniqlash mumkin bo'ladi. Tritiy beta zarralarining yo'l uzunligi taxminan 1-2 mkm, eng ehtimolli energiya 0,005 MeV ni tashkil qiladi va yo'l ko'p hollarda bitta kumush donasidan iborat bo'lib, bu nurlanish manbasini nafaqat nisbatan katta hujayralarda lokalizatsiya qilishga imkon beradi. yadro kabi tuzilmalar, balki alohida xromosomalarda ham.
Organizmga "yorliqlangan" metabolitlarning kiritilishi izotopning hayvon to'qimalarining hujayralariga kiritilishini kuzatish imkonini beradi, bu esa tirik organizmdagi turli xil biokimyoviy jarayonlarni o'rganish imkonini beradi.
Mutlaq ma'lumotlarni olish - o'rganilayotgan ob'ektdagi etiketli moddaning kontsentratsiyasi kamdan-kam hollarda radioavtografik tadqiqotning maqsadi hisoblanadi, buning uchun bir qator shartlarni bilish kerak, ularni aniqlash qiyin. Shuning uchun miqdoriy radioavtografik tadqiqotlar odatda sinov ob'ekti va nazorat ustidagi kumush donalarining kontsentratsiyasini taqqoslash yo'li bilan amalga oshiriladi, nazorat ma'lumotlari esa qulay tarzda bitta yoki 100% sifatida olinadi.
Amaldagi ayrim izotoplarning xarakteristikalari
biologik ob'ektlarning radioavtografiyasida
Radioaktiv fosforning beta-zarralari yadroviy emulsiyada bir necha millimetrgacha bo'lgan masofani uchib o'tishga qodir, yo'l o'nlab kamdan-kam joylashgan kumush zarralaridan iborat - masalan, radioaktiv fosfor faqat izotopning to'qimalarda tarqalishini o'rganish uchun ishlatilishi mumkin. , individual hujayra tuzilmalarida lokalizatsiya o'rnatilishi mumkin emas.
Radioaktiv oltingugurt va uglerod alohida hujayralardagi izotopni lokalizatsiya qilish uchun ishlatilishi mumkin, agar ular katta yoki bir-biridan etarlicha masofada joylashgan bo'lsa, bunga qon smearlarida yoki hujayra suspenziyalarida erishish mumkin.
Rezolyutsiya va usul xatolari, usul xatolari.
geometrik xato– chiqarilgan zarracha fotoqatlam yuzasiga istalgan burchak ostida yo‘naltirilishi mumkinligi tufayli. Binobarin, fotoqatlamdagi kumush donasi aynan radioaktiv atomdan yuqorida joylashmasligi mumkin, lekin zarrachalar harakati yoʻnalishiga va yoʻl uzunligiga (energiya) qarab koʻproq yoki kamroq joy almashishi mumkin.
fotosurat xatosi minglab metall atomlaridan tashkil topgan kumush donasi radioaktiv atomdan ancha katta ekanligi tufayli yuzaga keladi. Shunday qilib, kichikroq ob'ektning lokalizatsiyasi kattaroq ob'ektning pozitsiyasiga qarab baholanishi kerak.
Chiqarilgan zarrachalar va yadroviy fotografik emulsiyalarning past energiyasi (milli) bilan ajralib turadigan tritiydan foydalanganda, avtoradiografiya usulining o'lchamlari optik tizimlarning o'lchamlari - 1 mkm. Shunday qilib, bu xatolar natijaga sezilarli ta'sir ko'rsatmaydi.
Yaxshiroq aniqlikka erishish uchun kesmaning qalinligini, emulsiya qatlamini va ular orasidagi masofani kamaytirish kerak. Namuna biroz pastroq bo'lishi kerak.
Avtomatik yutilish effekti: Kumush donalarining soni hujayra tuzilmalari tomonidan nurlanishning yutilish darajasiga bog'liq bo'lib, beta zarralarining past diapazoni va past energiyasi tufayli ularning to'qimalarga singishi juda katta, bu belgining yo'qolishiga olib kelishi mumkin, shuning uchun savol tug'iladi. bo'limlarning qalinligi muhim bo'ladi. Kumush donalarining soni 5 mikrondan ortiq bo'lmagan bo'lak qalinligida to'qimalarning radioaktivligiga mutanosib ekanligi ko'rsatilgan.
Qalinligi bilan absorber qatlamidan o'tgan beta zarralarining nisbiy soni X Baer qonuni bo'yicha baholanishi mumkin -
N x/N 0 = e - m x
Bu erda m - yutilish koeffitsienti (qatlam qalinligining o'zaro nisbati, uning o'tishi paytida zarrachalar soni kamayadi. e bir marta. Yutish koeffitsientining qiymati taxminan R qiymatidan baholanishi mumkin m(maksimal diapazon), m R munosabatidan foydalanib, barcha izotoplar uchun ma'lum m= 10, bu juda qattiq bo'lmagan nurlanish uchun amal qiladi.
Agar birlik qalinlikdagi qatlamda vaqt birligida sirt tomon harakatlanuvchi n ta zarra bo'lsa, u holda qalinligi bo'lgan namunada X sirt N zarrachaga etadi:
Fon va artefaktlar: O'lchovlardagi xato mexanik ta'sirlar bilan ham kiritilishi mumkin - tirnalishlar, emulsiya yoriqlari yashirin tasvirning shakllanishiga olib keladigan va avtograflarni qayta ishlashda hisobga olinishi kerak bo'lgan fon nurlanishi. Preparatning bo'sh joyidagi kumush donalarining sonini hisoblash orqali fon hisobga olinadi. Xatolar, shuningdek, bo'limlarni gistologik qayta ishlash natijasida kiritiladi - spirtlar uchun simlar (suvsizlanish), kerosin bilan biriktirish, binoni. Ushbu protseduralar hujayra tuzilmalarining hajmi va nisbatiga ta'sir qilishi mumkin.
Belgilangan metabolitlarning radiatsiya ta'siri: Kam nurlanish energiyasi tufayli tritiy hujayrada sezilarli ionlanishni keltirib chiqaradi, bu uglerod beta zarralarining radiatsiya ta'siridan ancha yuqori. Natijada, etiketli birikmaning, masalan, 3 H-timidinning uzoq muddatli ta'siri bilan hujayralar yo'q qilinadi va o'ladi, bu esa to'qimalarning o'sishini to'xtatishga olib keladi. Avvalo, spermatogenez buziladi. Belgilangan metabolitlarning mutagen va kanserogen ta'siri haqida dalillar mavjud. Kuzatilgan sitologik o'zgarishlar hujayralar tomonidan mitotik siklning o'tishining buzilishi, hujayra ploidligining o'zgarishi va xromosoma aberratsiyasining paydo bo'lishidan iborat. Ammo, aftidan, izotopning hujayralarga zararli ta'siri tadqiqot natijalariga faqat uzoq tajriba sharoitida sezilarli ta'sir ko'rsatishi mumkin.
Radioaktivlik miqdorini aniqlash
Qoida tariqasida, tajribada kiritilgan izotopning mutlaq emas, balki nisbiy miqdori aniqlanadi. Yorliqning kiritilish darajasini ikki yo'l bilan baholash mumkin - densitometrik - bu makroavtograflarga va ob'ektlar ustidagi kumush donalarini to'g'ridan-to'g'ri hisoblashga ko'proq mos keladi. Ushbu ko'p vaqt talab qiladigan protsedura hozirda kompyuter yordamida amalga oshirilishi mumkin. Gistologik preparatning raqamli tasviri undagi hujayralar va hujayra tuzilmalarini avtomatik ravishda ajratib ko'rsatish va kumush donalari sonini hisoblash uchun maxsus dasturiy ta'minot tomonidan qayta ishlanadi. Agar miqdoriy baholash masalasi tug'ilsa, samaradorlik tushunchasini jalb qilish kerak. Ko'pincha samaradorlik deganda bitta radioaktiv parchalanishni ro'yxatga olish paytida hosil bo'lgan kumush donalarining soni tushuniladi. Usulning samaradorligiga ko'plab omillar, birinchi navbatda, ob'ektning qalinligi va emulsiya ta'sir qiladi.
Sintilatsiya hisoblagichidan foydalangan holda olib borilgan tadqiqotlarda daqiqada o'rtacha parchalanish soni va kumush donalarining soni o'rtasida yuqori korrelyatsiya aniqlandi. Hunt (Hant and Foote, 1967) ma'lumotlariga ko'ra, tajribada qo'llaniladigan emulsiyada bitta dona hosil bo'lishi 5,8 radioaktiv parchalanishga to'g'ri keladi, ya'ni usulning samaradorligi 17,8% ni tashkil qiladi.
Makroskopik preparatlarda tritiy miqdorini aniqlash uchun bir xil avtografga o'rnatilgan standart faollikka ega namunalardan foydalanish mumkin.
Taqqoslangan biologik ob'ektlarning radioaktivligini aniq baholash juda qiyin.
Radioavtografik tadqiqotning klassik namunasi ot loviya ildiz hujayralarining DNKsida 32 P ni to'plash bo'yicha ishdir (Howard va Pelc, 1953). Ushbu tajribada mitotik siklning to'rt davrga bo'linishi (mitoz - M, G 1 - presintetik davr, S - DNK sintezi, premitotik davr G 2) birinchi marta DNK sintez davri cheklangan vaqtni egallashi ko'rsatildi. mitozning boshidan va oxiridan vaqt bo'yicha ajratilgan interfazaning bir qismi. Xovard va Pelkning ma'lumotlari keyinchalik aniq DNK kashshofi, 3 H-timidin yordamida aniqroq tajribalarda tasdiqlandi.
Protein sintezini baholash usullari. Radioavtografik tadqiqotlarda umumiy oqsil sintezini baholash uchun eng keng tarqalgan prekursorlar 3 H-leysin, 3 H-metionin, 3 H-fenilalanindir. Masalan, tug'ruqdan keyingi rivojlanishning birinchi haftalarida kalamushlar miyasida umumiy protein sintezi leysin belgisi yordamida o'rganildi (Pavlik va Jakoubek, 1976). Gistonlar sintezini va ularning transkripsiyani tartibga solishga ta'sirini o'rganish uchun asosiy aminokislotalar 3 H-lizin va 3 H-arginin, kislotali oqsillarning sintezini o'rganish uchun 3 H-triptofan ishlatiladi. Aminokislota yorlig'ining inklyuziya zichligi oqsil sintezining intensivligiga mos keladi va shuning uchun neyronning funktsional faolligini aks ettiradi. Radioavtografik usul hayvonlarning turli to'qimalarida oqsil sintezi xususiyatlarini eksperimental ta'sir qilishda solishtirish imkonini beradi va alohida hujayra turlari va hujayra tuzilmalari (yadro, hujayra tanasi, neyron jarayonlari - aksonal) darajasidagi o'zgarishlar dinamikasini kuzatishga imkon beradi. transport).
Hozirgi vaqtda avtoradiografiya ko'pincha ma'lum retseptorlar uchun radioligandlardan foydalangan holda miyani o'rganish uchun ishlatiladi. Shunday qilib, hayvonlar va odamlarning miya tuzilmalarida turli retseptorlarni taqsimlash xaritalari tuzildi.
Avtoradiografiya, shuningdek, biokimyoda va immunoassaylar (RIA) bilan birgalikda jellarni ko'rish uchun ishlatiladi.
Adabiyotlar:
1. Epifanova O.I. va boshqalar Radio avtograf M., Oliy maktab, 1977 y
2. Sarkisov D.S. Perov Yu.L. Mikroskopik texnika M.: "Tibbiyot", 1996 yil
3.Rojers A.V. Amaliy avtoradiografiya, Amersham Buyuk Britaniya, 1982 yil
4.Bokshteyn S.Z. Ginzburg S.S. va boshqalar Metallshunoslikda elektron-mikroskopik avtoradiografiya M., «Metallurgiya»
Avtoradiogramma a fiya, avtoradiografiya, avtoradiografiya , oʻrganilayotgan obʼyektdagi radioaktiv moddalarning tarqalishini obʼyektga radioaktiv nurlanishga sezgir boʻlgan fotoemulsiya qoʻyish orqali oʻrganish usuli. Ob'ekt tarkibidagi radioaktiv moddalar o'zlarini suratga olish(shuning uchun ism). Avtoradiografiya usuli fizika va texnikada, biologiya va tibbiyotda, izotop izlagichlar qo'llaniladigan joylarda keng qo'llaniladi.
Fotografik emulsiyani ishlab chiqish va mahkamlashdan so'ng, unda o'rganilayotgan taqsimotni aks ettiruvchi tasvir olinadi. Ob'ektga fotografik emulsiya qo'llashning bir necha usullari mavjud. Namunaning sayqallangan yuzasiga fotosurat plitasi to'g'ridan-to'g'ri qo'llanilishi mumkin yoki namunaga iliq suyuqlik emulsiyasi qo'llanilishi mumkin, u qotib qolganda namunaga mahkam yondosh qatlam hosil qiladi va ekspozitsiya va fotosuratga ishlov berishdan keyin tekshiriladi. Radioaktiv moddalarning tarqalishi taqqoslash yo'li bilan o'rganiladi sinov va mos yozuvlar namunasidan plyonkaning qorayish zichligi(makroradiografiya deb ataladigan).
Ikkinchi usul fotografik emulsiyada ionlashtiruvchi zarrachalar hosil qilgan izlarni hisoblashdan iborat. optik yoki elektron mikroskop (mikroradiografiya). Bu usul birinchisiga qaraganda ancha sezgir. Makroavtograflarni olish uchun shaffoflik va rentgen emulsiyalari, mikroavtograflar uchun esa maxsus nozik taneli emulsiyalardan foydalaniladi.
O'rganilayotgan ob'ektda radioaktiv moddalarning tarqalishining avtoradiografiya yordamida olingan fotosurati deyiladi. avtoradiogramma yoki radioavtograf.
Radioizotoplar bilan belgilangan birikmalarni tanaga kiritish va avtoradiografiya yordamida to'qimalar va hujayralarni keyingi tekshirish quyidagilarga imkon beradi:
- haqida aniq ma'lumot olish qaysilari hujayralar yoki hujayra tuzilmalarida ma'lum jarayonlar sodir bo'ladi,
- mahalliylashtirilgan moddalar,
- bir qator jarayonlar uchun vaqt parametrlarini o'rnating.
Masalan, radioaktiv fosfor va avtoradiografiyadan foydalanish o'sayotgan suyakda intensiv metabolizm mavjudligini aniqlashga imkon berdi; radioyod va avtoradiografiyadan foydalanish qalqonsimon bezning faoliyat shakllarini aniqlashtirishga imkon berdi; etiketli birikmalar - oqsil va nuklein kislotalarning kashshoflari va avtoradiografiyaning kiritilishi ushbu muhim birikmalar almashinuvida ma'lum hujayrali tuzilmalarning rolini aniqlashga yordam berdi. Avtoradiografiya usuli nafaqat biologik ob'ektda radioizotopning lokalizatsiyasini, balki uning miqdorini ham aniqlashga imkon beradi, chunki emulsiyaning kamaytirilgan kumush donalari soni unga ta'sir qiluvchi zarrachalar soniga mutanosibdir. Miqdoriy tahlil makroavtograflar fotometriyaning odatiy usullari bilan, mikroavtograflar esa ionlashtiruvchi zarrachalar ta'sirida emulsiyada paydo bo'lgan kumush donalari yoki izlarni mikroskop ostida sanash orqali amalga oshiriladi. Avtoradiografiya elektron mikroskopiya bilan muvaffaqiyatli birlashtirila boshladi
