Diploma work antioxidant properties ng dihydroquercetin. Pangunahing pananaliksik
Sa pamamagitan ng pag-click sa pindutang "I-download ang archive", ida-download mo ang file na kailangan mo nang libre.
Bago i-download ang file na ito, tandaan ang magagandang sanaysay, kontrol, term paper, tesis, artikulo at iba pang mga dokumento na hindi na-claim sa iyong computer. Ito ang iyong trabaho, dapat itong lumahok sa pag-unlad ng lipunan at makinabang sa mga tao. Hanapin ang mga gawang ito at ipadala ang mga ito sa knowledge base.
Kami at lahat ng mga mag-aaral, nagtapos na mga mag-aaral, mga batang siyentipiko na gumagamit ng base ng kaalaman sa kanilang pag-aaral at trabaho ay lubos na magpapasalamat sa iyo.
Upang mag-download ng archive na may dokumento, maglagay ng limang digit na numero sa field sa ibaba at i-click ang button na "I-download ang archive"
Mga Katulad na Dokumento
Pag-aaral ng enzymatic at non-enzymatic pathways para sa pagbuo ng reactive oxygen species. Ang mga mekanismo ng kanilang nakakapinsalang epekto sa mga buhay na selula, lalo na, ang pagsisimula ng libreng radical lipid peroxidation. Antioxidant na depensa ng katawan.
term paper, idinagdag noong 01/11/2017
Antioxidant aktibidad ng mga materyales ng halaman. Paglalarawan ng mga halaman na may aktibidad na antioxidant. Pagpapasiya ng nilalaman ng bitamina C sa viburnum vulgaris sa panahon ng ripening, ang nilalaman ng polyphenolic compounds sa iba't ibang uri ng tsaa.
thesis, idinagdag 04/02/2009
Ang Gibberellins ay isang malawak na klase ng mga phytohormone na kumokontrol sa paglaki at pag-unlad: kasaysayan ng pagtuklas, istruktura ng kemikal, pag-uuri, nilalaman sa mga halaman. Biochemistry, mga function ng regulasyon at biological na aktibidad ng gibberellins, ang kanilang istraktura, mga katangian.
pagtatanghal, idinagdag noong 10/20/2014
abstract, idinagdag noong 05/19/2017
Biological na aktibidad at kemikal na istraktura ng brassinosteroids. Syntheses sa pangangalaga ng carbon skeleton. Ang pagbuo ng mga function na katangian ng cyclic na bahagi ng brassinosteroids. Pagbuo ng isang side chain na may pagbuo ng mga bagong carbon-carbon bond.
term paper, idinagdag noong 12/07/2014
Pag-aaral ng pisyolohiya ng pancreas, ang papel ng pancreatic juice sa proseso ng panunaw. Pagsusuri ng mga reaktibo na species ng oxygen at mga paraan ng kanilang pagbuo, biochemistry ng mga proseso ng free-radical. Pangkalahatang-ideya ng estado ng mga proseso ng metabolic sa talamak na pancreatitis.
term paper, idinagdag noong 03/10/2012
Kemikal na komposisyon ng genus Penstemon at biological na aktibidad. Qualitative phytochemical analysis ng mga hilaw na materyales ng halaman sa pamamagitan ng thin layer chromatography. Pagpapasiya ng dami ng komposisyon ng mga bahagi sa pamamagitan ng mataas na pagganap ng likido chromatography.
praktikal na gawain, idinagdag 01/07/2016
Antioxidants (AO)- mga sangkap na pumipigil sa oksihenasyon. Sa isang buhay na organismo, ang nangungunang kadahilanan sa oksihenasyon ay ang pagbuo ng mga libreng radikal; samakatuwid, ang pagkilos ng mga antioxidant sa mga biological system ay isinasaalang-alang pangunahin mula sa pananaw ng pagpigil sa oksihenasyon ng mga organikong sangkap ng mga libreng radikal.
Sa kasalukuyan, mayroong isang malaking bilang ng mga iba't ibang mga pamamaraan para sa pagtukoy ng mga antioxidant: photometric, kemikal, electrochemical, atbp. Gayunpaman, marami sa kanila ay may makabuluhang mga disbentaha na nagpapahirap sa pag-unawa at higit pang gamitin ang mga resulta na nakuha ng mga pamamaraang ito. Ang pinakakaraniwang disadvantages ay kinabibilangan ng mga sumusunod:
- Ang artipisyal o hindi pangkaraniwan para sa mga kondisyon ng biological system para sa pagsukat ng epekto ng antioxidant ay ginagamit. Halimbawa, sa halip na mga biological na free-radical na reaksyon, puro kemikal na redox na reaksyon ang ginagamit, o ang kakayahan ng isang substance na mag-donate / tumanggap ng mga electron kapag nalantad sa isang electric current ay sinusukat. Ang mga resulta ng mga sukat na nakuha sa ilalim ng naturang mga kondisyon ay hindi nagpapahintulot sa amin na sabihin na ang pagsubok na sangkap ay magpapakita ng parehong "antioxidant" na epekto sa katawan.
- Ang pagpapasiya ng pagkilos ng antioxidant ay isinasagawa sa pamamagitan ng pagsukat ng dami ng naipon na mga produkto ng oksihenasyon (mga marker ng oksihenasyon). Kaya, posible talagang matukoy ang dami ng antioxidant sa sample ng pagsubok, ngunit napalampas ang napakahalagang impormasyon tungkol sa aktibidad ng antioxidant. Ang pagwawalang-bahala sa aktibidad ng isang antioxidant, sa turn, ay maaaring humantong sa mga makabuluhang pagkakamali sa pagtukoy ng dami nito, halimbawa, para sa mga "mahina" na antioxidant na kumilos nang mabagal ngunit sa mahabang panahon.
Chemiluminescent na pamamaraan ay ang pinaka-nakapagtuturo na paraan para sa pag-aaral ng mga antioxidant at may isang bilang ng mga makabuluhang pakinabang:
- Direktang pagpapasiya ng aktibidad ng antioxidant- ang direktang pagkilos ng mga antioxidant sa mga libreng radikal ay naitala. Ang pamamaraang chemiluminescent ay gumagamit ng isang kemikal na libreng radical generation system na gumagawa ng control chemiluminescent glow. Pagkatapos ng isang antioxidant ay idinagdag sa naturang sistema, na neutralisahin ang mga libreng radical, na humahantong sa pagsugpo sa control chemiluminescence.
Ang isang makabuluhang bentahe ng diskarteng ito ay ang posibilidad ng paggamit ng iba't ibang mga sistema ng kemikal para sa pagbuo ng mga libreng radical, na ginagawang posible upang matukoy din ang pagtitiyak ng mga antioxidant at ang lokalisasyon ng kanilang pagkilos. - Pagsukat ng quantitative at qualitative na katangian ng antioxidants- ang pamamaraang chemiluminescent ay nagbibigay-daan sa pagkilala sa anumang tambalan na may epektong antioxidant sa pamamagitan ng dalawang independiyenteng tagapagpahiwatig:
- Anti-Oxidant Capacity (AOE)- ang kabuuang halaga ng mga libreng radikal na maaaring neutralisahin ang tambalang nakapaloob sa sample ng isang tiyak na dami.
- Antioxidant Activity (AOA)- ang rate ng neutralisasyon ng mga libreng radical, i.e. ang bilang ng mga radical na neutralisado bawat yunit ng oras.
Chemiluminescent na pamamaraan
ay nagbibigay ng mahalagang pag-unawa na ang pagkilos ng mga antioxidant ay dapat na masuri ng dalawang tagapagpahiwatig - dami (AOE) at husay (AOA).
Ang sumusunod na figure ay nagpapakita ng posisyong ito:
Impluwensya ng iba't ibang antioxidant sa chemiluminescence
(ang mga numero sa tabi ng mga graph ay nagpapahiwatig ng konsentrasyon ng antioxidant):
sa kaliwa - isang "malakas" na antioxidant, sa kanan - isang "mahina" na antioxidant.
Malaki ang pagkakaiba ng mga antioxidant sa kanilang aktibidad. May mga "malakas" na antioxidant, ibig sabihin. antioxidants na may mataas na aktibidad, na pumipigil sa mga libreng radical sa isang mataas na rate at ganap na pumipigil sa chemiluminescence. Ang ganitong mga antioxidant ay may pinakamataas na epekto na nasa mababang konsentrasyon at mabilis na natupok. Sa kabilang banda, may mga "mahina" na antioxidant, ibig sabihin. mga antioxidant na may mababang aktibidad, na pumipigil sa mga libreng radikal sa mababang rate at bahagyang pinipigilan ang chemiluminescence. Ang ganitong mga antioxidant ay may makabuluhang epekto lamang sa mataas na konsentrasyon, ngunit dahan-dahan silang natupok at kumikilos nang mahabang panahon.
Ang pamamaraan ng chemiluminescent ay maaaring gamitin upang matukoy ang mga parameter ng antioxidant:
- biological fluid (plasma, laway, ihi);
- mga paghahanda sa pharmacological at biologically active additives;
- inumin at food additives;
- mga produktong pampaganda at pangangalaga;
- at iba pa.
- Chemiluminometer Lum-100- nagbibigay ng kontrol sa temperatura at pagpaparehistro ng chemiluminescence ng 1 sample.
- Chemiluminometer Lum-1200- nagbibigay ng kontrol sa temperatura at sabay-sabay na pagpaparehistro ng chemiluminescence hanggang 12 sample.
Ang imbensyon ay nauugnay sa industriya ng pagkain at maaaring magamit upang matukoy ang kabuuang aktibidad ng antioxidant. Ang pamamaraan ay isinasagawa bilang mga sumusunod: ang analyte ay nakikipag-ugnayan sa reagent 0.006 M Fe(III) - 0.01 M o-phenanthroline. Ang ascorbic acid (AA) ay nakikipag-ugnayan sa parehong reagent, na idinagdag sa isang ratio na 1:100. Pagkatapos ay incubated para sa hindi bababa sa 90 minuto at photometered sa 510±20 nm. Pagkatapos nito, ang pag-asa ng halaga ng analytical signal sa dami ng sangkap ay itinatag at ang halaga ng kabuuang AOA ay kinakalkula. Ang ipinakita na pamamaraan ay nagbibigay-daan sa mas kaunting oras-ubos at mas maaasahang pagpapasiya ng kabuuang aktibidad ng antioxidant ng mga materyales ng halaman at mga produktong pagkain batay dito. 2 w.p. f-ly, 1 sakit., 5 tab.
Ang imbensyon ay nauugnay sa analytical chemistry at maaaring gamitin sa pagtukoy ng kabuuang antioxidant activity (AOA) ng mga plant materials at mga produktong pagkain batay dito.
Kilalang coulometric na paraan para sa pagtukoy ng kabuuang AOA ng tsaa, batay sa pakikipag-ugnayan ng mga may tubig na extract ng produkto na may elektrikal na nabuong mga bromine compound (I.F. Abdulin, E.N. Turova, G.K. Budnikov. Chemistry, 2001, vol. 56, no. 6, pp. 627-629). Ang pagpili ng mga electrogenerated bromine compound bilang isang titrant ay dahil sa kanilang kakayahang pumasok sa iba't ibang mga reaksyon: radical, redox, electrophilic substitution at pagdaragdag ng maramihang mga bono. Ginagawa nitong posible na masakop ang isang malawak na hanay ng mga biologically active tea compound na may mga katangian ng antioxidant. Ang mga kawalan ng pamamaraan ay ang posibilidad ng reaksyon ng bromination sa mga sangkap na hindi antioxidant, at ang pagpapahayag ng nagresultang halaga ng kabuuang AOA sa mga yunit ng dami ng kuryente (kC/100 g), na nagpapahirap sa pagsusuri. ang mga resulta.
Isang kilalang paraan ng voltammetric para sa pagtukoy ng kabuuang aktibidad ng antioxidant sa pamamagitan ng relatibong pagbabago sa kasalukuyang ng oxygen electroreduction sa potensyal na hanay mula 0.0 hanggang -0.6 V (rel. sat. c.s.e.) sa isang mercury-film electrode (Pat. 2224997, Russia IPC 7 G 01 N 33/01 Voltammetric na pamamaraan para sa pagtukoy ng kabuuang aktibidad ng antioxidants / E. I. Korotkova, Yu. Ang kawalan ng pamamaraang ito ay ang paglitaw ng mga side electrochemical reactions, na binabawasan ang kahusayan ng pagpapasiya ng mga antioxidant, na humahantong sa pagbawas sa pagiging maaasahan ng mga resulta.
Isang kilalang paraan para sa pagkontrol sa kabuuang AOA ng prophylactic at therapeutic antioxidant agent para sa lipid peroxidation sa malonic aldehyde na may spectrophotometric o chemiluminescent detection (Pat. 2182706, Russia, IPC 7 G 01 N 33/15, 33/52. funds / Pavlyuchenko I.I., Basov A.A., Fedosov S.R. - No. 2001101389/14; application 01/15/2001; publication 05/20/2002). Kasabay nito, ang aktibidad ng antioxidant ay inversely proportional sa antas ng mga produktong lipid peroxidation. Ang kawalan ng pamamaraang ito ay maaaring ituring na isang limitadong hanay ng mga nasuri na bagay, dahil sa ilalim ng mga kondisyong ito, ang mga antioxidant ng isang grupo lamang, ang mga lipid, ay tinutukoy.
Isang kilalang paraan para sa pagtukoy ng kabuuang AOA ng isang katas ng halaman, na binubuo sa pagpapapisa ng katas na may linetol at iron (II) sulfate, pagsisimula ng reaksyon ng oksihenasyon sa pamamagitan ng UV irradiation at kasunod na pakikipag-ugnayan sa thiobarbituric acid sa pagkakaroon ng triton X-100 ( Application 97111917/13, Russia, IPC 6 G 01 N 33/00 Paraan para sa pagtukoy ng kabuuang aktibidad ng antioxidant / Rogozhin VV - Appl. 08.07.1997; publ. 10.06.1999). Kapag nagsasagawa ng spectrophotometry, ginagamit ang isang halo ng ethanol at chloroform sa isang ratio na 7:3. Ang halaga ng AOA ng isang biological na materyal ay tinutukoy ng ratio ng akumulasyon ng produkto ng reaksyon - malondialdehyde sa isang sample na naglalaman ng isang katas sa isang sample na may isang prooxidant. Ang kawalan ng pamamaraang ito ay nakasalalay sa posibilidad ng mga side reaction sa panahon ng pag-iilaw ng UV, na binabawasan ang pagiging maaasahan ng mga resulta ng pagsusuri.
Ang mga nakalistang pamamaraan para sa pagtukoy ng kabuuang AOA ay may ilang mga disadvantages: mataas na lakas ng paggawa, mababang pagiging maaasahan, ang sinusukat na halaga ng kabuuang AOA ay hindi nauugnay at hindi maihahambing sa anumang karaniwang sangkap.
Ang pinakamalapit na analogue sa inaangkin na imbensyon ay isang paraan para sa pagtukoy ng kabuuang AOA ng mga halamang panggamot sa pamamagitan ng pagsukat ng chemiluminescence na nangyayari kapag tumutugon sa luminol sa pagkakaroon ng isang oxidizing agent hydrogen peroxide (M.Kh. canary grass by chemiluminescence // Journal of Analytical Chemistry, 2004, V.59, No. 1, P.84-86). Para sa isang quantitative assessment ng kabuuang AOA, ang pagbabawas ng kakayahan ng katas ng mga panggamot na hilaw na materyales at ang aktibidad ng isang makapangyarihang antioxidant - ascorbic acid sa halagang 25-110 μg ay inihambing. Kung ikukumpara sa mga pamamaraan sa itaas, sa prototype, ang hydrogen peroxide ay ginagamit bilang isang oxidizing agent, na nakikipag-ugnayan sa isang malawak na hanay ng mga antioxidant, at ang sinusukat na halaga ng kabuuang AOA ng bagay ay tinutukoy at ipinahayag na may kaugnayan sa ascorbic acid, na kung saan ay isang karaniwang antioxidant, na ginagawang posible na makakuha ng maaasahang mga resulta habang pinapanatili ang iba pang mga disadvantages. Kasama rin sa mga disadvantage ang pagiging kumplikado ng mga kagamitan na ginamit sa pamamaraan.
Ang teknikal na layunin ng inaangkin na imbensyon ay ang pagbuo ng isang mas kaunting oras-ubos at maaasahang paraan para sa pagtukoy ng kabuuang aktibidad ng antioxidant ng mga materyales ng halaman at mga produktong pagkain batay dito.
Upang malutas ang teknikal na problema, iminungkahi na makipag-ugnay sa analyte sa reagent 0.006 M Fe (III) - 0.01 M o-phenanthroline, at ascorbic acid (AA) na may parehong reagent, na idinagdag sa isang ratio ng 1:100 , incubated para sa hindi bababa sa 90 minuto, photometered sa 510±20 nm, na sinusundan ng pagtatatag ng dependence ng analytical signal sa dami ng substance at pagkalkula ng kabuuang AOA. Sa partikular, ang pagkalkula ay maaaring isagawa ayon sa formula (I), na nagmula sa equation ng quantitative correspondence sa pagitan ng bagay na pinag-aaralan at ascorbic acid:
kung saan ang a, b ay ang mga coefficient sa regression equation para sa pagtitiwala ng analytical signal sa halaga ng AA;
a", c" - mga coefficient sa equation ng regression para sa pagtitiwala ng analytical signal sa dami ng bagay na pinag-aaralan;
x araw. - masa ng pinag-aralan na ahente ng pagbabawas (sample), mg.
Ang paggamit ng iminungkahing reagent sa ilalim ng mga kundisyong ito ay nagpapahintulot sa amin na palawakin ang linear na hanay at bawasan ang mas mababang limitasyon ng mga tinukoy na halaga ng ascorbic acid. Ang iminungkahing hanay ng mga mahahalagang tampok ay nagbibigay-daan sa iyo upang matukoy ang kabuuang AOA ng isang malawak na hanay ng mga materyales ng halaman at mga produktong pagkain batay dito.
Ang mga quantitative correspondence equation ay nag-uugnay sa dependence ng analytical signal sa dami ng ascorbic acid at sa dependence ng analytical signal sa dami ng object na pinag-aaralan, sa kondisyon na ang antioxidant activity ay pantay.
Pagkatapos ng pagproseso ng mga resulta ng photometric measurements ng magnitude ng analytical signal sa pamamagitan ng least squares method (K. Derffel Statistics in analytical chemistry. - M .: "Mir", 1994. S. 164-169; A.K. Charykov Mathematical processing ng resulta ng pagsusuri ng kemikal - L .: Chemistry, 1984. S.137-144) ang mga dependency na ito ay inilarawan ng isang linear regression function: y=ax+b, kung saan ang a ay ang regression coefficient, b ay isang libreng miyembro. Ang coefficient a sa equation ng regression ay katumbas ng tangent ng slope ng tuwid na linya sa x-axis; koepisyent b - distansya sa kahabaan ng y-axis mula sa pinanggalingan (0,0) hanggang sa unang punto (x 1 , y 1).
Ang mga coefficient a at b ay kinakalkula ng mga formula:
Ang equation ng regression para sa pagtitiwala ng AS sa dami ng ascorbic acid sa isang partikular na oras ay may anyo:
y AK \u003d a x AK (mg) + b,
regression equation para sa pag-asa ng AS sa dami ng bagay na pinag-aaralan (reducing agent):
y VOST \u003d isang "x VOST (mg) + b",
kung saan para sa AK, para sa VOST ay ang optical density ng photometric solution;
x AK (mg), x VOST (mg) - konsentrasyon ng ascorbic acid (reducing agent) sa solusyon;
pagkatapos, sa pamamagitan ng pagpareho ng mga halaga ng mga pag-andar, nakakakuha kami ng formula (I) para sa pagkalkula ng aktibidad ng antioxidant ng bagay na pinag-aaralan sa mga yunit ng halaga (mg) ng ascorbic acid.
Ang pagguhit ay nagpapakita ng pag-asa ng analytical signal sa halaga ng pagbabawas ng ahente.
Ang optical density ng mga nasuri na solusyon ay sinusukat sa isang KFK-2MP photoelectric colorimeter.
Ito ay kilala (F. Umland, A. Yasin, D. Tirik, G. Vunsch Complex compounds sa analytical chemistry - M.: Mir, 1975. - 531 p.) na ang o-phenanthroline ay bumubuo ng isang nalulusaw sa tubig na chelate na may bakal ( II) pula-orange na kulay, na nailalarawan sa pamamagitan ng maximum na pagsipsip sa λ=512 nm. Samakatuwid, sa iminungkahing pamamaraan, ang photometry ay isinasagawa sa λ=510±20 nm.
Ang pag-optimize ng komposisyon ng reagent at ang halaga nito na ipinakilala sa reaksyon ay isinagawa batay sa mga resulta ng multifactorial na pagpaplano ng eksperimento gamit ang pamamaraang Latin Square, na binubuo sa pagbabago ng lahat ng pinag-aralan na mga kadahilanan sa bawat eksperimento, at bawat isa. antas ng bawat salik nang isang beses lamang nakakatugon sa iba't ibang antas ng iba pang mga salik. Binibigyang-daan ka nitong tukuyin at suriin ang epektong dulot ng bawat salik na pinag-aaralan nang hiwalay.
Ang mga sumusunod na salik ay ginamit: ang mga halaga ng Fe(III), o-phenanthroline, at ang dami ng reagent na ipinasok sa reaksyon. Ang kumbinasyon ng mga salik ay dapat magbigay ng malawak na hanay ng analytical signal (AS) linearity na may sapat na sensitivity, sa isang banda, at katatagan ng reagent sa paglipas ng panahon, sa kabilang banda. Ginawa nitong posible na iisa ang mga sumusunod na antas para sa bawat salik:
ang halaga ng Fe(III): 0.003 M (A 1); 0.006 M (A 2); 0.009 M (A 3);
dami ng o-phenanthroline: 0.01 M (B 1); 0.02 M (B 2); 0.03 M (B 3);
dami ng reagent: 0.5 ml (C 1); 1.0 ml (C 2); 2.0 ml (C 3) (Talahanayan 1).
Upang piliin ang pinakamainam na kumbinasyon ng mga antas ng kadahilanan, ang mga pag-asa sa pagkakalibrate ng AS sa dami ng ascorbic acid ay nakuha sa saklaw mula 10 hanggang 150 μg (na kinakailangan upang kumpirmahin ang linearity ng function), ang equation ng regression ng nakuha na pag-asa ay kinakalkula, at pagkatapos ay ang halaga ng AS sa isang naibigay na halaga (120 μg) ng ascorbic acid. Kaya, para sa bawat komposisyon ng reagent (mga kadahilanan A, B), ang dami (factor C) ay napili, kung saan ang halaga ng AC ay maximum. Ginawa nitong posible na bawasan ang bilang ng mga itinuturing na kumbinasyon sa siyam (Talahanayan 2).
Ang paghahambing ng kabuuang AS para sa bawat antas, ang mga halaga na may pinakamataas na halaga ay nakilala: ΣA 2 (0.991); ΣB 1 (1.066); ΣC 2 (1.361). Ginawa nitong posible na tapusin na ang komposisyon ng reagent ay pinakamainam: 0.006 M Fe (III) - 0.01 M o-phenanthroline kasama ang dami nito na ipinakilala sa reaksyon, 1.0 ml bawat 100 ml ng solusyon.
Sa pinakamainam na konsentrasyon ng reagent, pinag-aralan namin ang pagbabago sa pag-asa ng AS sa konsentrasyon ng ascorbic acid at ilang mga pagbabawas na ahente na karaniwan sa mga natural na bagay (tannin, rutin, quercetin) sa iba't ibang oras ng pagpapapisa ng itlog ng pinaghalong reaksyon (30, 60). , 90, 120 min). Napag-alaman na para sa lahat ng pinag-aralan na mga ahente ng pagbabawas, ang pag-asa ng AS sa kanilang nilalaman ay linear sa hanay na 10-150 μg (tingnan ang pagguhit) at ang halaga ng AS ay nakasalalay sa oras ng pagpapapisa ng itlog (talahanayan 3).
Makikita mula sa pagguhit na ang pagbabago sa AC sa ilalim ng pagkilos ng rutin ay hindi gaanong mahalaga, ang tannin ay lumalapit, at ang quercetin ay lumampas sa parehong pag-asa para sa ascorbic acid. Kung isasaalang-alang ang pagbabago sa AC mula sa oras ng pagpapapisa ng itlog para sa lahat ng pinag-aralan na pagbabawas ng mga ahente (Talahanayan 3), natagpuan na ang pag-stabilize ng analytical signal sa paglipas ng panahon ay sinusunod mula sa 90 minuto.
| Talahanayan 3 Pagbabago sa AS ng mga nagpapababang ahente sa paglipas ng panahon |
|||||
| Test substance | m sangkap, mg / cm 3 | Analytical signal | |||
| Oras ng pagpapapisa ng itlog ng pinaghalong reaksyon, min | |||||
| 30 | 60 | 90 | 120 | ||
| Bitamina C | 10 | 0,038 | 0,042 | 0,044 | 0,044 |
| 100 | 0,340 | 0,352 | 0,360 | 0,363 | |
| Tannin | 10 | 0,029 | 0,037 | 0,042 | 0,043 |
| 100 | 0,280 | 0,295 | 0,303 | 0,308 | |
| Rutin | 10 | 0,013 | 0,016 | 0,019 | 0,019 |
| 100 | 0,150 | 0,166 | 0,172 | 0,175 | |
| Quercetin | 10 | 0,031 | 0,044 | 0,051 | 0,053 |
| 100 | 0,420 | 0,431 | 0,438 | 0,442 |
Upang patunayan ang kabuuan ng likas na katangian ng tinukoy na halaga ng AOA, ang epekto ng reagent Fe (III) - o-phenanthroline sa mga solusyon sa modelo, na kinabibilangan ng mga ahente ng pagbabawas: tannin, rutin, quercetin, at ascorbic acid sa iba't ibang ratios, ay pinag-aralan. Ang talahanayan 4 ay nagpapakita ng mga resulta ng pagsusuri ng mga pinaghalong modelo.
| Talahanayan 4 Mga resulta ng pagsusuri ng mga pinaghalong modelo (P=0.95; n=3) |
|||||||||
| Ang bilang ng mga sangkap sa pinaghalong | Kabuuang AOA, nakalkula, mcgAA | Kabuuang AOA, natagpuan, mcgAA | |||||||
| ipinakilala | sa mga tuntunin ng AK | ||||||||
| AK | Tannin | Rutin | Quercetin | AK | Tannin | Rutin | Quercetin | ||
| - | 20 | 20 | 20 | - | 16,77 | 9,56 | 32,73 | 59,06 | 57,08 |
| - | 10 | 10 | 10 | - | 8,35 | 4,77 | 16,41 | 29,53 | 26,95 |
| - | 50 | 10 | 10 | - | 42,02 | 4,77 | 16,41 | 63,20 | 55,04 |
| - | 10 | 50 | 10 | - | 8,35 | 23,93 | 16,41 | 48,69 | 50,06 |
| - | 10 | 10 | 50 | - | 8,35 | 4,77 | 81,70 | 94,82 | 91,61 |
| - | 30 | 10 | 10 | - | 25,19 | 4,77 | 16,41 | 46,37 | 39,24 |
| - | 10 | 30 | 30 | - | 8,35 | 14,35 | 49,06 | 71,76 | 73,47 |
| 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 16,77 | 9,56 | 32,73 | 79,06 | 96,29 |
| 50 | 10 | 10 | 10 | 50 | 8,35 | 4,77 | 16,41 | 87,95 | 93,07 |
| 10 | 50 | 10 | 10 | 10 | 42,02 | 4,77 | 16,41 | 73,20 | 78,15 |
| 10 | 10 | 50 | 10 | 10 | 8,35 | 23,93 | 16,41 | 58,69 | 78,74 |
| 10 | 10 | 10 | 50 | 10 | 8,35 | 4,77 | 81,70 | 104,82 | 121,45 |
| 30 | 30 | 10 | 10 | 30 | 25,19 | 4,77 | 16,41 | 76,37 | 84,59 |
| 10 | 10 | 30 | 30 | 10 | 8,35 | 14,35 | 49,06 | 81,76 | 103,31 |
Ang pagkalkula ng teoretikal na halaga ng kabuuang AOA ay isinasagawa ayon sa mga equation ng quantitative correspondence na nagpapakilala sa kapasidad ng antioxidant ng pinag-aralan na pagbabawas ng ahente na may paggalang sa ascorbic acid, sa ilalim ng mga kondisyon ng pantay na aktibidad ng antioxidant: .
Ang halaga ng pang-eksperimentong (nahanap) AOA ay kinakalkula gamit ang average na regression equation para sa pagtitiwala ng AS sa dami ng ascorbic acid. Mula sa mga resulta na ipinakita sa Talahanayan 4, makikita na ang mga eksperimento na nakuhang mga halaga ng AOA ay sumasang-ayon nang kasiya-siya sa mga teoretikal na kinakalkula.
Kaya, ang natukoy na halaga ng AOA ay isang kabuuang tagapagpahiwatig, at ang pagpapasiya ng halaga nito gamit ang mga equation ng quantitative correspondence ay tama.
Ang iminungkahing pamamaraan ay nasubok sa mga tunay na sample. Upang matukoy ang kabuuang AOA ng isang tunay na sample o ang katas nito, ang mga pagdepende sa pagkakalibrate ng AS sa dami ng analyte at ascorbic acid ay nakuha sa isang incubation time ng reaction mixture na hindi bababa sa 90 minuto. Ang pagkalkula ng kabuuang AOA ay isinagawa ayon sa formula (I) at ipinahayag sa mg ng ascorbic acid bawat gramo ng test object (mgAA/g).
Upang kumpirmahin ang kawastuhan ng iminungkahing pamamaraan, ang mga sample na ito ay sinubukan ayon sa mga kilalang pamamaraan, sinusuri ang nilalaman ng ascorbic acid (GOST 24556-89 Mga naprosesong produkto ng prutas at gulay. Mga pamamaraan para sa pagtukoy ng bitamina C) at ang nangingibabaw na mga ahente ng pagbabawas: sa tsaa - tannin (GOST 19885-74 Tea. Paraan para sa pagtukoy ng nilalaman tannin at caffeine), sa rosehips - ang halaga ng mga organic acids (GOST 1994-93 Rosehips. Mga Pagtutukoy) (talahanayan 5).
1 Milentiev V.N. 2Sannikov D.P. 3Kazmin V.M. 21 Oryol State Institute of Economics and Trade
2 Institusyon ng Badyet ng Pederal na Estado "Sentro para sa Chemicalization at Radiology ng Agrikultura "Orlovsky"
3 Federal State Budgetary Educational Institution of Higher Professional Education "State University - Educational, Scientific and Industrial Complex"
Ang posibilidad ng paggamit ng chemiluminescence upang masuri ang aktibidad ng antioxidant ng mga sangkap ng pagkain ay pinag-aralan. Ang iminungkahing paraan ay batay sa chemiluminescence ng luminol sa isang alkaline medium, ang intensity nito ay depende sa dami ng peroxide sa chemiluminescent sample. Ang Chemiluminescence ay naitala gamit ang isang binuo na setup na naglalaman ng dosing pump, isang light-tight chamber, isang glass vacuum photomultiplier tube, at isang computer system. Upang mapahusay ang chemiluminescence, isang solusyon ng potassium ferricyanide ay idinagdag sa luminol. Ang mga pagbabago sa intensity ng chemiluminescence ay naitala sa sandali ng pagpapakilala ng nasuri na sample sa luminol solution. Ang dandelion extract na nakuha sa pamamagitan ng dry low-temperature distillation ay ginamit bilang nasuri na sample. Naglalaman ito ng mga phenolic compound na kilala sa kanilang mataas na aktibidad na antioxidant. Ito ay itinatag na ang pamamaraan ng chemiluminescence ay maaaring gamitin upang matukoy ang mga katangian ng antioxidant ng iba't ibang mga compound ng pagkain.
chemiluminescence
aktibidad ng antioxidant
peroxides
sustansya
1. Vasiliev R.F. Chemical glow // Chemistry at chemists, 21.01.10. – URL: http://chemistry-chemists.com. (petsa ng pag-access: 22.08.13).
2. Vladimirov Yu.A. Mga libreng radical at antioxidant // Vestn. RAMN. - 1998. - Bilang 7. - P. 43-51.
3. Kondrashova E.A. Chemiluminescence bilang ang pinakasensitibong paraan ng enzyme immunoassay at ang paggamit nito. Mga diagnostic ng klinikal na laboratoryo. - 1999. - No. 9. - P. 32.
4. Lyubimov, G.Yu. Chemiluminescent analysis // Immunology. - 1991. - Hindi. 1. - P. 40–49.
5. Mayansky A.N., Nevmyatullin A.L., Chebotar I.V. Ang reaktibong chemiluminescence sa phagocytosis system // Microbiology. - 1987. - Hindi. 1. - S. 109–115.
6. Sherstnev M.P. Calcium-dependent at calcium-independent pathways ng cell chemiluminescence generation. Mga Isyu sa Chemiluminescence. - 1991. - Hindi. 2. - S. 1–4.
Ngayon, ang chemiluminescence ay isang malaking lugar ng agham na matatagpuan sa interface sa pagitan ng chemistry, physics at biology. Sa chemiluminescence, mayroong direktang conversion ng enerhiya ng kemikal sa enerhiya ng mga electromagnetic oscillations, i.e. sa mundo. Gamit ang chemiluminescence, matututunan ng isa ang tungkol sa kung paano nagpapatuloy ang reaksyon, ano ang mekanismo nito, na kinakailangan para sa mahusay at makatwirang pag-uugali ng mga teknolohikal na proseso. Kung ang teknolohikal na proseso ng pagkuha ng anumang produktong kemikal ay sinamahan ng chemiluminescence, kung gayon ang intensity nito ay maaaring magsilbing sukatan ng bilis ng proseso: mas mabilis ang reaksyon, mas maliwanag ang glow. Sa panahon ng reaksyon ng chemiluminescence, ang mga produktong mayaman sa enerhiya ay nakuha, na pagkatapos ay nagbibigay ng enerhiya sa pamamagitan ng paglabas ng liwanag, ibig sabihin, ang enerhiya ng kemikal ay na-convert sa electromagnetic radiation energy.
Ang layunin ng pag-aaral ay upang galugarin ang posibilidad ng paggamit ng chemiluminescence upang masuri ang aktibidad ng antioxidant ng mga sangkap ng pagkain.
Mga resulta ng pananaliksik at talakayan
Ang problema sa pagtatasa ng aktibidad ng antioxidant ng mga sangkap ng pagkain ay napaka-kaugnay. Ang paggamit ng terminong "antioxidant activity" upang ipakita ang pagiging kapaki-pakinabang ng isang partikular na produkto ay kadalasang ginagawa nang walang anumang kemikal at biochemical na argumento. Bilang isang patakaran, ang aktibidad ng antioxidant ng anumang sangkap ay tumutukoy sa pagiging epektibo ng pagbawas ng halaga ng peroxide. Ang mismong konsepto ng halaga ng peroxide ay hindi rin ganap na nagbubunyag ng kemikal na kakanyahan nito, dahil hindi ito ganap na tumutugma sa kinetics at thermodynamics ng mga yugto ng metabolismo ng isang partikular na produkto ng pagkain. Bilang karagdagan, ang halagang ito ay ginagamit upang makilala ang mga lipid sa anyo ng mga taba. Gayunpaman, ang mga proseso ng oksihenasyon at ang pagbuo ng mga peroxide sa katawan ay nangyayari hindi lamang sa paggamit ng mga taba, kundi pati na rin sa iba pang mga produkto. Sa madaling salita, ang nilalaman ng peroxide sa isang partikular na produkto ay masasabing "timbang" sa isang uri ng balanse, kung saan ang "reference weight" ay isang yunit ng konsentrasyon sa isang acidic na kapaligiran ng iodide ion na na-oxidized ng peroxides, bilang isang resulta kung saan nabuo ang molecular iodine:
ako- - e → ako; (isa)
I + I → I20. (2)
Kapag ang molecular iodine ay titrated na may solusyon na naglalaman ng sodium thiosulfate, ang konsentrasyon nito ay itinatag at, dahil dito, ang dami ng mga oxidizer ng iodide ions ay natutukoy, i.e. peroxide compounds, na talagang tinatawag na peroxide number. Ang pagtukoy sa halaga ng peroxide gamit ang ganitong uri ng "pagtimbang" ay batay sa reaksyon na ipinapakita sa fig. isa.
kanin. 1. Pagtukoy ng halaga ng peroxide gamit ang sodium thiosulfate
Kaya, ang konsentrasyon ng mga peroxide ay tinutukoy mula sa equation
С(I2) = ϒ(C[-O-O-]), (3)
kung saan ang ϒ ay ang koepisyent ng ugnayan sa pagitan ng konsentrasyon ng molecular iodine at ng konsentrasyon ng mga peroxide.
Ang iminungkahing paraan para sa pagtukoy ng mga peroxide sa mga produkto ay batay sa chemiluminescence ng luminol (C[lm]) sa isang alkaline medium, ang intensity (Ichl) na depende sa konsentrasyon ng peroxides (C[-O-O-]), sa isang sample ng chemiluminescent:
IHL. = Ϧchl ω, (4)
kung saan ang Ϧchl ay ang quantum yield ng chemiluminescence; ω - rate ng reaksyon na kinasasangkutan ng mga peroxide:
khlC[-O-O-] C[lm] = ω, (5)
kung saan ang kchl ay pare-pareho ang rate ng reaksyon o sa:
C[lm] kchl Ϧchl = K, (6)
IХЛ = K C[-O-O-]. (7).
Ang dami ng peroxide (-O-O-) ay tinutukoy ng light sum (S):
Ang halaga ng S ay depende sa antas ng pagkakumpleto ng pagkonsumo ng peroxide sa chemiluminescent reaction.
Upang matukoy ang pare-parehong K, ang isang calibration curve ay itinayo para sa pagtitiwala ng light sum S sa konsentrasyon ng peroxide, na tinutukoy ng titration:
S = f(C[-O-O-]). (9)
Ang hydrogen peroxide H2O2 ay ginagamit bilang peroxides.
Pagkatapos ay inihambing ang mga datos na nakuha mula sa equation (3) at (9). Batay sa paghahambing ng ϒ at K, ang isang konklusyon ay ginawa tungkol sa kasunduan ng mga mekanismo ng reaksyon na pinagbabatayan ng pagpapasiya ng mga peroxide sa pamamagitan ng mga pamamaraang ito. Napag-alaman na sa hanay na ito ng mga konsentrasyon ng peroxide ϒ at K ay talagang sumasang-ayon sa isa't isa at samakatuwid ay magagamit ang mga ito upang matukoy ang halaga ng peroxide.
Ang chemiluminescence ay naobserbahan sa isang alkaline medium na naglalaman ng luminol (5-amino-1,2,3,4-tetrahydro-1,4-phthalazinedione, 3-aminophthalic hydrazide, H2L). Ito ay naitala gamit ang isang chemiluminescent setup, kabilang ang isang glass vacuum photomultiplier. Ang photomultiplier ay pinapagana ng isang mataas na boltahe na rectifier (7) na isinama sa isang bloke (9) na nagpapalakas sa signal ng photomultiplier, na naitala sa display ng monitor ng computer (5).
kanin. 2. Pagpaparehistro ng chemiluminescence ng nasuri na produkto: 1 - dosing pump; 2 - hindi tinatablan ng liwanag na silid; 3 - salamin; 4 - cuvette; 5 - sistema ng computer; 6 - photomultiplier; 7 - mataas na boltahe rectifier; 8 - isang aparato na nagbibigay-daan sa iyo upang matukoy ang parang multo na rehiyon ng chemiluminescent radiation; 9 - i-block ang pagpapalakas ng signal ng photomultiplier
Ang isang dosing pump (1) ay kinakailangan upang ipasok ang nasuri na sample sa isang cuvette (4) na naglalaman ng isang chemiluminescent na solusyon ng luminol. Ang dispenser na ito ay gumaganap bilang isang stirrer para sa iniksyon na sample na may isang chemiluminescent solution. Upang mapahusay ang rate ng reaksyon at intensity ng chemiluminescence, isang solusyon ng potassium ferricyanide ay idinagdag sa luminol. Ang paghahalo ay isinasagawa ng mga bula ng hangin na nakuha sa pamamagitan ng pagbomba ng hangin sa pamamagitan ng solusyon na likido na may bomba. Ang salamin (3) na matatagpuan sa silid na masikip sa ilaw (2) ay nagsisilbi para sa mas mahusay na pagkolekta ng liwanag ng insidente ng chemiluminescent radiation sa photo-cathode ng photomultiplier (6) na naka-mount sa light-tight chamber. Hinahayaan ka ng dispenser na ipasok ang nais na mga bahagi ng likido sa cuvette nang hindi binubuksan ang light-tight chamber (2) sa panahon ng mga eksperimento. Sa kasong ito, ang mga likidong ito ay pumapasok sa cuvette (4) sa pamamagitan ng salamin o plastik na mga tubo. Pinapayagan ka ng computer system na irehistro ang dependence ng luminescence intensity I sa oras t, iyon ay, ang chemiluminescence kinetics:
Ang sistema ng computer ay sumasalamin sa pagtaas at pagbaba ng mga constant sa function na I = f(t), na kung saan ay conjugated sa rate constants ng mga reaksyon na nagdudulot ng chemiluminescence, iyon ay, sa kanilang mga kinetics. Ang isang aparato (8) ay kasama sa silid ng chemiluminescent, na ginagawang posible upang matukoy ang spectral na rehiyon ng chemiluminescent radiation, iyon ay, ang pagtitiwala:
I = f1(λ). (labing isang)
Ang bloke na ito ay isang cassette sa anyo ng isang disk, kung saan naka-mount ang mga filter ng hangganan. Ang pagbabago ng mga light filter ay isinasagawa sa pamamagitan ng pag-ikot ng disc cassette tungkol sa pahalang na axis na kumukonekta sa mga sentro ng eroplano ng mga light filter at ang eroplano ng photocathode ng photomultiplier.
Ang proseso ng pagsukat ay isinasagawa tulad ng sumusunod:
1. Ang tugon ng photomultiplier sa mga pagbabago sa supply boltahe nito at sa mga pagbabago sa intensity ng reference light source na bumabagsak sa cathode nito ay nakatakda.
2. Ang cuvette ay puno ng isang solusyon ng luminol sa isang alkaline medium.
3. Ang dispenser ay puno ng nasuri na sample.
4. Ang dependence ng intensity ng chemiluminescence sa oras t ay naitala. Ang chemiluminescence ay sinusubaybayan hanggang sa oras na t1, kung saan ang pagbabago sa I1 mula sa oras na t ay minimal: I1 = f1(t).
5. Ang isang bahagi ng nasuri na solusyon ay pinapakain gamit ang isang dispenser.
6. Ang chemiluminescence ng nasuri na sample ay sinusunod, ang kinetics nito ay I = f(t).
Sa fig. Ang Figure 3 ay nagpapakita ng isang graph ng dependence ng mga function (I1 = f1(t)), conjugated sa isang graph (I = f(t)), pagkatapos ng pagpapakilala ng nasuri na solusyon.
Gaya ng makikita sa fig. 3, ang intensity ng chemiluminescence ng luminol ay nagbabago: ang isang matalim na pagtaas ay sinusundan ng isang matalim na pagbaba sa luminescence pagkatapos ng pagdaragdag ng nasuri na sample.
Dahil ang pagpapahusay ng chemiluminescence sa panahon ng oksihenasyon ng luminol ay nauugnay sa pagbuo ng mga peroxide, ang pagbaba sa intensity ng chemiluminescence pagkatapos ng pagpapakilala ng nasuri na sample ay nagpapahiwatig ng pagbawas sa kanilang bilang. Samakatuwid, maaari nating pag-usapan ang pagkakaroon ng aktibidad ng antioxidant sa mga compound na bumubuo sa nasuri na sample.
Dapat tandaan na ang dandelion extract na nakuha sa pamamagitan ng dry low-temperature distillation, na naglalaman ng mga phenolic compound na kilala sa kanilang mataas na antioxidant activity, ay ginamit bilang nasuri na sample.
kanin. Fig. 3. Dependence graph ng mga function (I1 = f1(t)), conjugated sa graph (I = f(t)), pagkatapos ng pagpapakilala ng nasuri na solusyon
Bilang karagdagan, sa panahon ng eksperimento, natagpuan na ang paggamit ng chemiluminescence ay posible upang matukoy ang dami ng mga peroxide sa mga superdilute system, na mahalaga para sa pagtatasa ng simula ng oksihenasyon ng mga produkto, halimbawa, sa panahon ng kanilang imbakan.
Kaya, ipinakita ng mga isinagawang pag-aaral na ang pamamaraan para sa pagtukoy ng mga peroxide sa mga produkto, batay sa chemiluminescence ng luminol sa isang alkaline medium, ay ginagawang posible upang suriin ang aktibidad ng antioxidant ng mga sangkap ng pagkain at maaaring magamit upang maitaguyod ang mga katangian ng antioxidant ng iba't ibang pagkain. mga compound.
Mga Reviewer:
Litvinova E.V., Doktor ng Teknikal na Agham, Propesor ng Kagawaran ng Teknolohiya, Organisasyon at Kalinisan ng Pagkain, OrelGIET, Orel;
Kovaleva O.A., Doktor ng Biological Sciences, Direktor ng INITs, FSBEI HPE "Oryol State Agrarian University", Orel.
Ang gawain ay natanggap ng mga editor noong Nobyembre 08, 2013.
Bibliograpikong link
Panichkin A.V., Bolshakova L.S., Milentiev V.N., Sannikov D.P., Kazmin V.M. PAGGAMIT NG CHEMILUMINESCENCE PARA SA PAGSUSURI NG ANTIOXIDANT PROPERTIES NG NUTRIENTS // Pangunahing Pananaliksik. - 2013. - Hindi. 10-11. – S. 2436-2439;URL: http://fundamental-research.ru/ru/article/view?id=32810 (petsa ng access: 12/17/2019). Dinadala namin sa iyong pansin ang mga journal na inilathala ng publishing house na "Academy of Natural History"
